多酚(Total phenolic)含量测定方法

概要:本方法适应于紫锥菊,红景天等提取物中多酚含量的检测,不适应于葡萄籽,松树皮,绿茶提取物中多酚含量的检测.
e(\%ij1NPG9D*Q 一, 仪器与试剂hz[;L0f+Kk
紫外--光分光光度计UV—2101PC.
&Nq#S)?_d)I,I f 10%碳酸钠溶液:取10g无水碳酸钠于90ml水中溶解后放置过夜,过滤备用.VZ$XK["b
F-C试剂:在1000ml园底烧瓶中加入350ml水,再加入50g Na2WO4-H2O, 12.5g Na2MoO4,25ml 85%H3PO4,50ml浓HC1,加入几粒沸石,在电炉上加热回流10h,用50ml水冲洗冷凝管,加入75g Li2SO4-H2O,几滴Br2,开口煮沸15min,溶液最终颜色为黄色,无蓝与绿色痕迹.冷却至室温后加水定容至500ml,过滤置棕色瓶中贮于冰箱保存备用.| V[ Qr[
二,  溶液制备.Q0~;Jj#q z
1. 对照品溶液制备  精密称取干燥至恒重的没食子酸(或同时测定没食子酸中水分后按无水没食子酸等效计算)约75mg于50ml容量瓶中,加水溶解定容.精密吸取上述溶液2ml于50ml容量瓶中,用水稀释至刻度即得对照品溶液.uQ/T V;gi/w9N
2. 样品溶液制备   精密称取待测提取物样品适量于50ml容量瓶中,加水约30ml,超声振荡20min后,再加约10ml甲醇超声10min,放置至室温,用甲醇定容(需要时稀释,多酚浓度约为6mg/50ml~10mg/50ml)即得样品溶液.溶液浑浊时应过滤.
8CL R2`g6D 三,  样品测定6F3f|ZeZU(g*M
分别精密吸取1, 2, 3ml对照品溶液, 1ml样品溶液, 1ml甲醇于100ml容量瓶中,加约60ml水混匀后加入5ml F-C试剂,于30秒后8分钟前加入25ml 20%碳酸钠溶液,混匀,用水稀释至刻度,放置2h后在765nm处以试剂空白作参比测吸收值,以对照品瓶中多酚绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品瓶中多酚绝对量(mg).
6lZK7KS;ru 多酚含量(%)=(C×50×N)/W×100%
zUb_y,D#T {5U C为由工作曲线计算的样品瓶绝对量;W为样品称样量(mg);N为稀释倍数| uV"d1DZ~IeB:@o
注:
%y3aXK1I;S YH9H 1.        新制F-C试剂应校正标准曲线或重新绘制标准曲线.{IlA7s}l#]
2.        吸收值在0.15—0.35间与浓度呈线性关系.

三,  样品测定[url]www.plantextra.com.l4O[/url]+f6{,N
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@ U:V5h)y+Q] 分别精密吸取1, 2, 3ml对照品溶液, 1ml样品溶液, 1ml甲醇于100ml容量瓶中,加约60ml水混匀后加入5ml F-C试剂,于30秒后8分钟前加入25ml 20%碳酸钠溶液,混匀,用水稀释至刻度,放置2h后在765nm处以试剂空白作参比测吸收值,以对照品瓶中多酚绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品瓶中多酚绝对量(mg).
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这有点小错误，是加入25ml 10%碳酸钠溶液