多酚(Total phenolic)含量测定方法

概要:本方法适应于紫锥菊,红景天等提取物中多酚含量的检测,不适应于葡萄籽,松树皮,绿茶提取物中多酚含量的检测."WEQ4J
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一, 仪器与试剂
;A_(uD4u!c4d 紫外--光分光光度计UV—2101PC.XQE'e!T.W:m ^S
10%碳酸钠溶液:取10g无水碳酸钠于90ml水中溶解后放置过夜,过滤备用.vM~:|,FT7he
F-C试剂:在1000ml园底烧瓶中加入350ml水,再加入50g Na2WO4-H2O, 12.5g Na2MoO4,25ml 85%H3PO4,50ml浓HC1,加入几粒沸石,在电炉上加热回流10h,用50ml水冲洗冷凝管,加入75g Li2SO4-H2O,几滴Br2,开口煮沸15min,溶液最终颜色为黄色,无蓝与绿色痕迹.冷却至室温后加水定容至500ml,过滤置棕色瓶中贮于冰箱保存备用.3\M-k0v^/s!Y/Uw4I
二,  溶液制备
S Z2fO"vn 1. 对照品溶液制备  精密称取干燥至恒重的没食子酸(或同时测定没食子酸中水分后按无水没食子酸等效计算)约75mg于50ml容量瓶中,加水溶解定容.精密吸取上述溶液2ml于50ml容量瓶中,用水稀释至刻度即得对照品溶液.Q4[0e/~)L0z
2. 样品溶液制备   精密称取待测提取物样品适量于50ml容量瓶中,加水约30ml,超声振荡20min后,再加约10ml甲醇超声10min,放置至室温,用甲醇定容(需要时稀释,多酚浓度约为6mg/50ml~10mg/50ml)即得样品溶液.溶液浑浊时应过滤.0B~}:W @lb
三,  样品测定
rS9e9g.Y\$L6` 分别精密吸取1, 2, 3ml对照品溶液, 1ml样品溶液, 1ml甲醇于100ml容量瓶中,加约60ml水混匀后加入5ml F-C试剂,于30秒后8分钟前加入25ml 20%碳酸钠溶液,混匀,用水稀释至刻度,放置2h后在765nm处以试剂空白作参比测吸收值,以对照品瓶中多酚绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品瓶中多酚绝对量(mg). aRg S`D;y%KXS
多酚含量(%)=(C×50×N)/W×100%
-vU/{Ip@+W,NgE C为由工作曲线计算的样品瓶绝对量;W为样品称样量(mg);N为稀释倍数Jm&}P Me{
注: |^-E"eJ*TvydS
1.        新制F-C试剂应校正标准曲线或重新绘制标准曲线._ag'n0wPEx
2.        吸收值在0.15—0.35间与浓度呈线性关系.

三,  样品测定[url]www.plantextra.com.l4O[/url]+f6{,N
e:o/R`,s4[:w f`3H 分别精密吸取1, 2, 3ml对照品溶液, 1ml样品溶液, 1ml甲醇于100ml容量瓶中,加约60ml水混匀后加入5ml F-C试剂,于30秒后8分钟前加入25ml 20%碳酸钠溶液,混匀,用水稀释至刻度,放置2h后在765nm处以试剂空白作参比测吸收值,以对照品瓶中多酚绝对量(mg)与对应吸光度作工作曲线,由工作曲线计算样品瓶中多酚绝对量(mg).8li,BGQ8P$p

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9Rz-h[4hjF;A 这有点小错误，是加入25ml 10%碳酸钠溶液