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标题: [求助] 柱层析问题!
zzp530135
士兵
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#1
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发表于 2008-5-10 19:37
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柱层析问题!
我做了几次柱层析试验出现了以下几个问题,请各位帮忙解答一下!
-l*N"\0[.x(m$}$}%Y"['U+|中国植提论坛|植提网
第一、我现在是在摸索柱层析的上样流速、上样量、洗脱剂浓度、洗脱剂用量、洗脱流速等条件,用的是3.2cm×40cm的层析柱。我们实验室有个老师说这些得用小点的柱子做,是这样吗?在实验中发现我用现在的柱子做的工作确实比较大,想换成小柱子!但是考虑到后面要做出产品还是要换成大柱子,如果现在用小柱子以后放大,那些条件不知道该怎么样放大!
*@*V8i-[+r5?,j;\.Ewww.plantextra.com
第二、实验检测发现上样收集的流出液都没有生物活性了,但是上样后的水洗脱也却有生物活性,这是怎么回事?样液收集液没有活性是可能上样量太小没有泄露吗?
.K*]8P5l,a&G3|1U"y+X
第三、我的柱子在上样,水洗杂质时都不会出现气泡,但是在洗脱是换成无水甲醇就会出现许多的气泡了,这是怎么回事?是装柱出现了问题还是换洗脱剂时没有一个浓度的过渡呢?这个问题该如何解决呢?
--------------------------以上所有观点仅代表网友个人观点,不代表本站观点。--------------------------
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少尉
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#2
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发表于 2008-5-11 08:12
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1、小柱子的工作量较大,建议采用小的柱子。放大的时的条件是由树脂的量和样品的量决定的,可以根据小柱子的数据进行成倍扩大就可以了!
www.plantextra.com({2r3O)d3R.V3G6u,N
2、这说明你的活性物质是水溶性的,可以改用反相色谱!
植提之家,植提空间,中国植提论坛,植提论坛,植提网&w){$z*j*f"]!P"T
3、可以逐步替换到甲醇,就可以了!
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#3
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发表于 2008-5-12 12:11
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水直接换到甲醇极性跨度太大,所以有气泡!
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